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豬腸道病毒抗原的研制

作者：zsz發布時間：2015/4/6 19:44:31點擊量：454

1豬腸道杯狀病毒的分子流行病學調查從多個腹瀉豬場共采集腹瀉豬糞便189份,采用RT-PCR方法進行分子流行病學調查。檢出豬腸道杯狀病毒陽性病料24份,陽性率為12.70%(24/189)。測序后與國外已發表的毒株比較,表明了我們所測定毒株的序列與豬腸道杯狀病毒中豬札如病毒代表株Cowden最相近(同源性介于75.60%-88.3%之間),證實了其均為豬札如病毒,首次發現該病毒存在于我國豬群中。但是未檢測到豬腸道杯狀病毒的另一個成員:豬諾如病毒。這是我國豬腸道杯狀病毒的首次報道。2豬札如病毒衣殼蛋白基因的克隆與表達參照GenBank中豬札如病毒衣殼蛋白基因序列設計引物,從發病仔豬的腹瀉糞便中擴增得到衣殼蛋白基因,經純化、連接、轉化,將其克隆到pMD18-T中,所克隆衣殼蛋白基因序列與GenBank中收錄的其他豬札如病毒衣殼蛋白基因序列的同源性在81.3%-91.3%。另設計1對引物,利用基因工程方法將所克隆的衣殼蛋白的編碼序列亞克隆到表達載體pET-28a(+)中,轉化大腸桿菌Rosetta(DE3)獲得表達重組菌。